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抗體，是我們非常熟悉的一種生物試劑， 但我們對抗體的鑒定，選擇又了解多少呢？

抗體即是B淋巴細(xì)胞抗原受體的可溶性形式，專門由成熟的B淋巴細(xì)胞產(chǎn)生。

抗體免疫球蛋白分子由2條重鏈和2條輕鏈構(gòu)成，根據(jù)其結(jié)構(gòu)不同，可以把小鼠和人體內(nèi)的抗體分為五類亞型?？贵w分子的各個鏈之間以二硫鍵相連，從而使整個分子具有一定的靈活性。分子中沒有輕鏈的部分稱為可變區(qū)或Fc段（可結(jié)晶部分）;此區(qū)域是由一組固定的基因所決定，同一個種屬中的所有同亞型抗體此區(qū)域是一致的。分子中既有重鏈又有輕鏈的部分稱為恒定區(qū)或Fab段（抗原結(jié)合區(qū)）; 此區(qū)域的極端包含識別并結(jié)合靶抗原表位的高可變位點(diǎn)。Fab段也是由一組固定的基因決定，但需要進(jìn)一步的體細(xì)胞突變產(chǎn)生獨(dú)特的和高特異的可變位點(diǎn)（圖1）。

圖一、抗體的分子結(jié)構(gòu)

檢測任何目的靶蛋白都有不止一種抗體可供選擇，在同一個抗體公司，可能會有好幾種，甚至好幾十種；在不同的抗體公司，那就更多了。那怎樣在琳瑯滿目的抗體中，選擇自己實(shí)驗(yàn)需要的抗體呢？

主要考慮如下幾種因素：

析自己實(shí)驗(yàn)應(yīng)用的實(shí)驗(yàn)方法是哪種？

分析自己實(shí)驗(yàn)中標(biāo)本的種屬是哪種動物或人的？

分析樣本中的蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)性質(zhì)。

分析抗體的標(biāo)記和檢測。

分析抗體的宿主來源種屬等等。

1.分析自己實(shí)驗(yàn)應(yīng)用的實(shí)驗(yàn)方法是哪種？

一般抗體說明書都列出該抗體經(jīng)試驗(yàn)驗(yàn)證過適用于何種分析類型，如：可以應(yīng)用于WB、IHC、ICC、ELISA、FCM分析

2.分析自己實(shí)驗(yàn)中標(biāo)本的種屬是哪種動物或人的？

一般抗體說明書都列出該抗體經(jīng)試驗(yàn)驗(yàn)證過適用于何種動物或人的標(biāo)本，如：可以用于rat、mouse、human、pig、goat等動物的標(biāo)本的實(shí)驗(yàn)。

3.分析樣本中的蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)性質(zhì)

了解樣本蛋白的結(jié)構(gòu)性質(zhì)有助于選擇最合適的抗體，至少兩方面因素需要考慮

待測樣本蛋白的結(jié)構(gòu)域：抗體是由各種不同免疫原免疫宿主而制備得來，其中的免疫原包括：全長蛋白、蛋白片斷、多肽、全有機(jī)體（如：細(xì)菌）或細(xì)胞，抗體說明書一般都有免疫原的描述，如果打算檢測的是蛋白片斷或一種特殊的同型物或蛋白全長的某一區(qū)域，則必須選擇用含此片段域的免疫原制備出的抗體。如果打算用FCM流式檢測活細(xì)胞的表面蛋白，則需要選擇含該表面蛋白的胞外域來免疫制備的抗體。

樣本的提取或處理過程：某些抗體要求樣本經(jīng)過某些特殊處理，例如：許多抗體只識別還原和變性的、表位已暴露不受二級四級結(jié)構(gòu)阻礙的蛋白樣本，另一方面，某些抗體僅識別天然折疊狀態(tài)的蛋白。當(dāng)選擇免疫組化的抗體時，應(yīng)注意某些抗體只識別未固定的冷凍的組織，而另一些抗體則適用于無需抗原修復(fù)解交聯(lián)步聚的甲醛固定石蠟包埋的組織，這些都會在抗體說明書上應(yīng)用部分標(biāo)示出來。

4.抗體宿主物種的選擇

一般說來，在使用偶聯(lián)二抗結(jié)合無偶聯(lián)物的一抗時，一抗宿主動物的物種選擇較為重要，對于免疫組化而言，盡可能選擇與樣本不同種系物種的一抗，從而避免二抗與樣本內(nèi)源性免疫球蛋白產(chǎn)生交叉反應(yīng)，例如：檢測小鼠樣本蛋白，則不應(yīng)選擇小鼠或大鼠源的一抗，最好選兔源的一抗，則二抗則可選擇偶聯(lián)了檢測分子（酶、熒光素、生物素等）的抗兔IgG。如果選擇有偶聯(lián)物的一抗則不適用上述情況，除免疫組化外的其它對不含內(nèi)源性免疫球蛋白樣本的檢測方法，則抗體宿主物種的影響不大，如對不含IgG的細(xì)胞裂解物樣本的western blotting檢測，盡管如此，含有血清的組織裂解物和組織培養(yǎng)上清中含有免疫球蛋白，還原變性樣本中含IgG，在western blot檢測中則結(jié)合出現(xiàn)IgG分子50 and 25 kDa的重鏈和輕鏈條帶。

默克品牌介紹-抗體

默克集團(tuán)（Merck KGaA）創(chuàng)建于1668年，擁有約350年歷史，總部位于德國達(dá)姆施塔特市（Darmstadt），該集團(tuán)主要致力于創(chuàng)新型制藥、生命科學(xué)以及前沿功能材料技術(shù)， 并以技術(shù)為驅(qū)動力，為患者和客戶創(chuàng)造價值。

默克（Merck）在國內(nèi)備有近500種抗體，涵蓋了表觀、神經(jīng)、腫瘤、干細(xì)胞、信號通路等多個熱門領(lǐng)域。默克和sigma整合后，有超過9萬種的抗體。

默克抗體特色

質(zhì)量更高 ：抗體投訴率行業(yè)更低。

種類更全：超過9萬種抗體，滿足更多實(shí)驗(yàn)需求

文獻(xiàn)更多：抗體總引用數(shù)和涉及文章均高居第二

結(jié)果更可靠 ：抗體經(jīng)嚴(yán)格內(nèi)部驗(yàn)證

Labome網(wǎng)調(diào)查，文獻(xiàn)引用率前3甲

專業(yè)化抗體生產(chǎn)流程

嚴(yán)格的內(nèi)部質(zhì)量控制

覆蓋十幾個熱門領(lǐng)域

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