德國(guó)默天旎推出新一代流式抗體——REAfinity流式抗體,即Recombinant Engineered Antibody,此類抗體背景值低,特異性好,解決了流式染色中的幾大問題,如同型對(duì)照難選、經(jīng)常需阻斷Fc片段非特異性結(jié)合等難題。
1、什么是REAfinity流式抗體:
◆ 挑選最佳克隆號(hào)的抗體,以該抗體序列作為改造的基礎(chǔ),所以REA抗體親和力更高、特異性更好;
◆該抗體是Fab段序列+ humanIgG1 Fc段序列;
◆ 抗體Fab段決定特異性,F(xiàn)c段起骨架支撐作用;
◆ 對(duì)Fc段序列進(jìn)行點(diǎn)突變,使其不會(huì)對(duì)Fcγ受體產(chǎn)生非特異性結(jié)合;
◆ 抗體Fc段和Fc受體的非特異性結(jié)合是設(shè)置同型對(duì)照和封閉步驟的原因,改造或突變后就能消除這種非特異性結(jié)合的影響;
◆該重組序列通過基因工程技術(shù),在HEK293細(xì)胞株中表達(dá)純化,相對(duì)于傳統(tǒng)的雜交瘤抗體,純度更高、特異性更好。
2、REAfinity抗體應(yīng)用match示例
REA154抗體檢測(cè)鼠Dectin-1+細(xì)胞(特異性更好、染色指數(shù)更高)
REAfinity抗體不會(huì)對(duì)Fcγ受體產(chǎn)生非特異性結(jié)合,無需封閉步驟,甚至可以不用同型對(duì)照。
3、REAfinity流式抗體優(yōu)勢(shì):
1)同型對(duì)照選擇極其簡(jiǎn)單——通用同型對(duì)照
所有REAfinity抗體的Fc段均為human IgG1亞型;可以共用同一種同型抗體REA293。
由于胞內(nèi)抗體和表面抗體、human抗體和mouse抗體濃度有所不同,所以同一種同型抗體分為四種:
· Human Surface REA293;
· Human Intracellular REA293;
· Mouse Surface REA293;
· Mouse Intracellular REA293;
客戶根據(jù)實(shí)驗(yàn)選擇一類對(duì)應(yīng)的熒光素即可。
2)更好的抗體純度,無批次間差異
相對(duì)于傳統(tǒng)雜交瘤抗體,基因工程抗體優(yōu)勢(shì)明顯。