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早上，花草樹(shù)枝在露水的滋潤(rùn)下，顯得精神煥發(fā)，散發(fā)出陣陣清香。小鳥(niǎo)在枝
01
蛋白質(zhì)是生物體中至關(guān)重要的分子，其結(jié)構(gòu)和功能對(duì)于生命活動(dòng)具有重要影響。蛋白質(zhì)譜檢測(cè)作為一種先進(jìn)的分析技術(shù)，為我們提供了深入了解蛋白質(zhì)的工具。它不僅可以幫助我們鑒定和定量蛋白質(zhì)樣品，還可以揭示蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)、修飾和相互作用等信息，常見(jiàn)的質(zhì)譜儀器主要有質(zhì)譜質(zhì)量分析儀（MS）和液相色譜（LC）等儀器，用于離子化、分離和檢測(cè)蛋白質(zhì)樣品。
蛋白質(zhì)質(zhì)譜鑒定方法通常使用串聯(lián)質(zhì)譜（MS/MS）和液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用（LC-MS/MS）等方法，其中，簡(jiǎn)單蛋白樣本用MS/MS，混合復(fù)雜蛋白樣本用LC-MS/MS。兩種方法作用原理相似：先將蛋白質(zhì)利用蛋白酶消化成肽段，肽段在質(zhì)譜儀中會(huì)離子化帶上一定量的電荷，離子檢測(cè)器可以鑒定各肽段的質(zhì)荷比，從而獲知各肽段的相對(duì)分子質(zhì)量；質(zhì)譜儀會(huì)繼續(xù)打斷某些肽段再次分析，生成二級(jí)質(zhì)譜，從而獲得肽段的序列信息；通過(guò)質(zhì)譜數(shù)據(jù)庫(kù)比對(duì)分析，即可鑒定蛋白質(zhì)。
蛋白質(zhì)譜檢測(cè)主要有一下幾種應(yīng)用，生物制品開(kāi)發(fā)：蛋白質(zhì)譜檢測(cè)在生物制品的研發(fā)過(guò)程中起著重要作用，可以幫助鑒定和驗(yàn)證蛋白質(zhì)產(chǎn)品的純度、結(jié)構(gòu)和功能；生物標(biāo)志物鑒定：通過(guò)蛋白質(zhì)譜檢測(cè)，可以發(fā)現(xiàn)與特定疾病相關(guān)的生物標(biāo)志物，為早期診斷和治療提供依據(jù)；藥物代謝研究：蛋白質(zhì)譜檢測(cè)可用于研究藥物在體內(nèi)的代謝過(guò)程，揭示藥物的藥代動(dòng)力學(xué)和藥效學(xué)特征。
根據(jù)質(zhì)譜檢測(cè)原理，我們可以知道蛋白樣本制備的過(guò)程至關(guān)重要，這決定了最終質(zhì)譜結(jié)果的好與壞，而蛋白樣本制備的關(guān)鍵就在于蛋白內(nèi)切酶的選擇了。
Lysyl Endopeptidase®質(zhì)譜級(jí)賴氨酰肽鏈內(nèi)切酶
本產(chǎn)品是質(zhì)譜分析前處理時(shí)常用的蛋白分解酶即賴氨酰肽鏈內(nèi)切酶，該酶可以特異性切除賴氨酸基團(tuán)C末端的多肽，可用于蛋白測(cè)序分析和Lys-X化合物的酶合成。若同時(shí)使用賴氨酰肽鏈內(nèi)切酶和胰酶，可更好地切斷賴氨酸基團(tuán)的多肽，增加多肽的數(shù)量。產(chǎn)品已按照使用習(xí)慣做成小包裝，是方便使用的冷凍干燥品。20 μg/支可用于100-200個(gè)樣品的凝膠內(nèi)消化。
細(xì)菌
凍干粉（包含２mmol/L Tris-HCl緩沖液，pH８）
0.03～0.07 AU/vial
27,000（瓊脂糖過(guò)濾），30,000（SDS-PAGE）
溶于水或緩沖液
溶解于pH值5.0-12.0的Tris緩沖液中，可在４℃穩(wěn)定保存２年；在pH值6.0-11.0、30℃時(shí)能穩(wěn)定保存，但溫度超過(guò)50℃時(shí)不穩(wěn)定。
9.0~9.5
6.9~7.0
可水解底物——Tos-Lys-OMe、Bz-Lys-NH2、Bz-Lys-pNA、Lys-pNA
不可水解底物——Bz-Arg-NH2、Bz-Arg-pNA、Arg-pNA
DFP、PMSF、TLCK
高特異性、高蛋白質(zhì)消化率、適用于蛋白質(zhì)譜分析
提高裂解效率、增加肽段數(shù)量
根據(jù)使用量特意制備小包裝，方便使用
分別采用胰蛋白酶（Tp）、賴氨酰肽鏈內(nèi)切酶（Lys-C）和Tp與Lys-C 聯(lián)用進(jìn)行膠內(nèi)酶切的效果比較。
牛血清蛋白BSA的條帶（100 ng）通過(guò)SDS-PAGE獲得，然后分別用Tp、Lys-C 和 Lys-C+Tp進(jìn)行酶切，再用MALDI-TOFMS法進(jìn)行分析。這些蛋白酶的實(shí)驗(yàn)效果見(jiàn)下表，這些結(jié)果表明Lys-C酶解的漏切位點(diǎn)數(shù)（Missed Cleavage）最少。Tp酶解時(shí)加入Lys-C后，漏切位點(diǎn)數(shù)有所降低，同時(shí)，可以鑒定出更多的多肽。
表1：Tp、Lys-C 和 Lys-C+Tp的結(jié)果對(duì)照
胰蛋白酶（Tp）（圖 ａ）和賴氨酰肽鏈內(nèi)切酶（Lys-C）+Tp（ 圖 ｂ）
酶切后的質(zhì)譜結(jié)果對(duì)照?qǐng)D。
Lys-C+Tp酶切后，可以在m/z=2000時(shí)得到吸收峰，而單獨(dú)的Tp酶切在m/z=2000時(shí)沒(méi)有吸收峰。該結(jié)果表明 Lys-C 可以提高測(cè)序覆蓋度。
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Lysyl Endopeptidase®, MS Grade |
20μg×5 |
質(zhì)譜級(jí) |
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Lysyl Endopeptidase®, MS Grade |
20μg |
質(zhì)譜級(jí) |
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Endoproteinaseglu C, Sequencinggrade 測(cè)序級(jí)谷氨酰蛋白內(nèi)切酶Glu-C |
50μg |
生物化學(xué)分析級(jí) |
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Trypsin, from Porcine Pancreas, Mass Spectrometrygrade |
20μg×5 |
質(zhì)譜級(jí) |
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產(chǎn)品 名稱 |
處理體積 |
規(guī)格 |
級(jí)別 |
產(chǎn)品數(shù)據(jù)來(lái)源富士膠片和光(廣州)貿(mào)易有限公司
http://labchem.fujifilm-wako.com.cn/pdf/show/152.html
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